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植物组织培养的设备与使用方法(五)
3.无菌操作的步骤
1)将植物组织块放入一个广口玻璃瓶中,加入含有几滴活化剂的浓度适当的消毒液,使材料完全浸没在消毒液中,盖上瓶盖,把玻璃瓶置于超净工作台,在消毒期间不时摇动玻璃瓶。
2)消毒结束后,打开瓶盖,将消毒液倒出,注入适量的无菌蒸馏水(经高压灭菌后),再盖上盖,摇动数次,将水倒掉,如此重复 3-4 次。
3)将材料取出,放在一个已经灭过菌的培养皿中。
4)在对植物材料进行消毒处理的同时,对所要使用的器械进行消毒,先在90%酒精中蘸一下取出,在酒精灯火焰上消毒,然后放在器械架上冷却备用。所有操作器械在每次使用后均需要再用火焰消毒一次。
5)使用消过毒的器械(如解剖刀、解剖针、打孔器、剪刀等)从已经过表面消毒的材料切取适当的外植体。如果需要用解剖镜,应事先用 70%酒精棉擦拭显微镜台表面进行消毒。
6)打开培养容器,将外植体接种到培养基上。如果使用的是玻璃培养容器,把瓶口置酒精灯火焰上烘烤数秒钟,然后迅速用瓶盖或封口膜封严。
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