3 瓶外生根的影响因素
3.1 生长素对生根的影响
在植物的组织培养中，植物激素起着决定性的作用，而生长素都能促进生根。不定根的发生和发育的整个阶段都需要连续补充生长素，生长素的存在不仅有利于根原基的诱导，还有利于不定根的生长。但过高的生长素也会抑制根原基的生长，进而影响根的伸长。大量的研究表明，根原基的启动和形成阶段生长素起着关键作用，而根原基的伸长和生长则可以在没有外源生长素的条件下实现。生长素可能主要在根的诱导和发端起作用，但根原基形成后，较高浓度的生长素的继续存在则不利于幼根的生长发育。瓶外生根正是基于上述原理，生根起始阶段采用高浓度的生长素刺激根原基的形成，根原基伸长阶段撤掉生长素，解除其抑制作用。曾端香等在研究牡丹繁殖技术时指出，丛生芽在试管外生根，IAA 水平升高后才有利于不定根的形成。因此生长激素的存在对试管苗瓶外生根是必需和必要的。
3.2 试管苗的质量对瓶外生根的影响
不同的植物、不同基因型、不同的幼化程度对分化不定根有决定性的影响。一般木本植物比草本植物难，只有多继代后，年龄越幼化生根才容易。无根试管苗进行瓶外生根前，必须进行炼苗过程。何云芳等在进行金线莲组培苗的试管外生根时采用松口炼苗的成活率比封口炼苗提高 5.3%。李红旭在研究一品红试管苗试管外生根时指出，通过强光充足练苗，使试管苗茎干及叶柄发红，幼茎组织充实，达到较高木质化程度，可提高抗性，促进了生根。经过锻炼的试管苗，叶片抗蒸腾作用和适应能力增强，光合性能显著提高，适应外界环境的能力增强。进一步说明，生长旺盛的苗比生长细弱的苗生根力强。因此，多继代，半木质化，叶片肥厚，茎秆粗壮的无根苗是获得较高生根率的保证。
3.3 不同生根方式对瓶外生根的影响
国内外瓶外生根大多采用微体扦插法进行，即将无根苗切下，经过生长素处理后，扦插到基质中，进行保湿管理，来完成生根的方法。微体扦插基质一般采用既透气又保湿的基质如苔藓、蛭石、珍珠岩、泥炭等。何云芳等在进行金线莲组培苗试管外生根时指出，以苔藓作基质最为理想，地下和地上部分的生长都最为旺盛，成活率最高。陈宗礼等在研究狗头枣组培苗试管外生根时认为，蛭石具有透气性、保水性都较好，即可满足基部的吸水要求，又不会因湿度过大导致腐烂而死苗，生根率达到 70.5%，生根数多而长，根系发育完整而健壮。在进行一品红试管苗试管外生根时认为：珍珠岩空隙大，质轻，透气性好，且有一定的保水能力，扦插成活率最高，达到 83.8%。试管苗气培生根作为瓶外生根的一种方法，在国内也有了一定的研究。冯学赞等分别对木本植物和草本植物的气培生根进行了较为详细的研究。将试管苗的茎段进行激素处理后，放到无任何基质的气培容器中进行生根，人为调节环境条件。其生根率与常规生根培养不相上下。董玲等在进行组培满天星时，采用瓶外水培生根，将健壮试管苗的茎段用生根粉处理后，然后扦插进行水培，覆膜保湿管理。其生根率在 90%以上，且根系发达，生长势强。
3.4 环境条件对瓶外生根的影响
瓶外生根过程中的湿度、温度和光照条件是获得成功的关键因素。试管苗一般生长在高湿、弱光、恒温条件进行异养培养，出瓶后若不保湿，极易失水萎蔫死亡。因此，试管苗进行瓶外生根时，必须经过高湿到低湿，恒温到自然变温，弱光到强光的分步炼苗过程。瓶外生根前期采取覆膜或喷雾等方法进行，保证空气相对湿度在 85%以上，温度起始阶段控制在 20°左右较为适宜，并及时增加光照，以保证苗基部的正常呼吸，并防止叶片失水萎蔫。瓶外生根后期采取加强通风逐渐降低湿度和温度，以增强幼苗的自养能力，促进叶片保护功能快速完善，气孔变小，增强抗性和适应外界环境条件的能力，生根率提高。温度、光照、基质水分和空气湿度的平衡是获得较高生根率的保证。在影响瓶外生根的环境因子中，最重要的是温度，其次是基质水分和湿度，最后是光照。