试管苗增殖率的估算:
试管苗增殖率是指植物快繁系统中繁殖体的繁殖率。试管苗增殖率的估算多以芽、苗或无根嫩茎为单位;对于那些较难统计的培养产物,如原球茎、胚状体等则以瓶为单位。增殖率的计算有理论计算和实际计算两种方法。
1、试管苗增殖率理论值的计算:
试管苗增殖率的理论值是指接种一个芽或一块增殖培养物,经过一定时间的培养后得到的芽或苗数。试管苗理论上的年繁殖量的大小,可以采用如下公式来计算:Y=mXn
Y——年繁殖系数;
m——无菌母株苗数;
X——每个培养周期增殖的倍数;
n——全年可增殖的周期次数。
例1 一株高6cm的马铃薯试管苗,被剪成4段转接于继代培养基上,30d后这些茎段平均又再生出 3个6cm高的新苗,如此反复培养半年后,理论上可以获得多少株马铃薯的试管苗?
将已知m=1株,X=4*3=12倍,n=6*30/30=6次,代入公式得:
Y=mXn =1*126 =2985984株
即一株马铃薯试管苗经半年的继代培养后,理论上可以获得2985984株新生试管苗。
上述公式还可以作为年生产计划的制定提供依据。如在葡萄试管苗的生产中,若一株无菌苗每周期繁殖 3倍,一个月为一个繁殖周期,那么,自今年8月至明年2月,欲培养5000株成苗应当从多少株无菌苗开始培养?根据上述公式可知:m=Y/Xn。
将Y=5000,
X=3,
n=6
代入公式得:m=5000/36 =6.86个苗
若把培养物的污染率、试管苗不合格率已经成活率等因素都考虑在内,保险系数应增加一倍,即最初应从6.86*2≈14个原种无菌苗开始培养,半年后才能生产5000株成苗。
2、试管苗增殖率实际值的计算
试管苗增殖率的实际值是指接种一个芽或转接一个苗,经过一定的繁殖周期所得到的实际芽或苗数。众所周知,每一次继代培养所得到的新苗并非都可利用,其中有弱苗、不正常苗及操作引起的损伤苗和污染苗等,它们可统称为损耗苗而要被淘汰掉,因为它们在组培中是由一些随机因素引起的客观现实。据曹孜义等(1986)报道,葡萄一个芽理论上一年可繁殖出 23万-220万株苗,而实际上只能得到3万株成活苗,由此可看出实际值远比理论值低。理论计算虽说可以作为一个参考指标来计算产量和制订生产计划,但它的可参考性较低。
试管苗实际增殖值的计算方法是通过生产实践的经验积累而获得的。为了使计算数据更接近实际生产值,有必要引入有效苗和有效繁殖系数等概念。
有效苗(Ne,effective seedlings):指在一定时间内平均生产的符合一定质量要求的能真正用于继代或生根的试管苗。
有效苗率(Pe ,percentage of effective seedlings):指有效苗在繁殖得到的新苗数中所占的比率。
有效繁殖系数(C,the effective propagation coefficient):指平均每次继代培养中由一个苗(或芽段)得到有效新苗的个数。
若设Ne为有效苗数,N0为原接种苗数,Nt为新苗数,L为损耗苗数,C为有效繁殖系数,Pe为有效苗率,则有:
Ne =Nt– L
Pe =Ne/Nt
C= Ne/N0=Nt·Pe /N0
那么,m个外植体连续n次继代繁殖后所获得的有效试管苗数(Y)为:
Y=mCn=m(Ne/N0)n=m(Nt·Pe/N0)n
Y——有效试管苗数;
m——无菌母株苗数;
n——全年可增殖的周期次数。
例2 一株高6cm的马铃薯试管苗,被剪成4段转接于继代培养基上,30d 后这些茎段平均又再生出3个6cm高的新苗,其中可用于再次转接繁殖的苗为新生苗的85%。如此反复培养半年后,可以获得多少马铃薯的试管苗?
将已知 m=1,
Nt=4*3*4=48,
n=(6*30)/30=6,
Pe=85%,
N0=4。
代入公式得:Y=m(Nt·Pe/N0)n=1*(48*85%/4)6≈1126162 株。
众所周知,由试管苗到合格的商品苗,一般还要经过生根培养、炼苗与移栽等程序,其中也客观存在消耗。若有效生根率为R1,生根移栽成活率为R2,成活苗中合格商品苗率为R 3 ,那么,m个外植体经过一定时间的试管繁殖后所获得的合格商品苗总量M为:M=Y·R1·R2·R3……
例3 如若马铃薯试管苗的有效诱导生根率为 85%,移栽成活率为90%,合格商品苗的获得率为95%,那么,例2中所得的试管苗最终可以培养出多少株合格商品苗?
M=Y·R1·R2·R3 =1126162*85%*90%*95%≈818438株
相比之下,理论估算值比有效增殖值高出2.65 倍,比合格商品苗总量高出3.65倍。可见,引入有效苗和有效繁殖系数等概念后,组培苗增殖值与合格商品苗产量等数值的计算更加符合生产实际,不失为组培苗增殖率实际值计算的一种好方法。