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组培知识

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树莓组织培养技术&附培养基配方

一、材料类别
外植体的选取分为两种,一是生长旺季时枝条中部带腋芽茎段;二是早春腋芽萌动前,取枝条于室内水培,腋芽刚萌动时剥取的茎尖。
二、培养条件
增殖培养基:MS+6BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L生根培养基:1/2MS+IBA1.0mg/L所有培养基均附加30g/L的蔗糖和4g/L的琼脂。pH5.6~5.8。培养温度为(25±2)℃,光照强度1500~2000lx。光周期12h~14/d。
三、材料与方法
取健壮树莓植株,刷表面,并吸干表面水分,剪成2~3cm长带芽的茎段。按以下程序进行灭菌处理:将材料放入高温灭菌过的烧杯中加入70%的酒精,浸5~7s后倒出酒精,用无菌水冲洗2遍用0.1%的HgCl消毒8~10min,用无菌水冲洗5遍,每次2min,切去材料受伤面,将带芽茎段切成长度为0.5~1.0cm的单芽小段,或剥除芽鳞切取长度5~7mm的茎尖,接种培养。
四、炼苗与移栽
移栽前5天左右,在室内将封口膜打开1/3左右,使幼苗与空气有一定接触。2天后,移栽到驯化温室内,使幼苗完全暴露在空气中,要适当遮荫,避免高温和强光直接照射,3天后即可移栽。移栽时将幼苗取出,小心洗去根部的培养基,去掉老叶,放入铺有湿报纸的盒子,要注意保湿。栽培基质为消毒后的黄沙,用镊子划痕后,夹住幼苗根部,插入至第一轮叶,用手小心压紧,用薄膜覆盖,保持温度在21℃~25℃,控制好水分和温度,移栽成活率可达80%以上。
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