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组培知识

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水解酪蛋白有酸水解和酶水解在使用过程中有没有区别?有些树种受伤后会分泌出一些白色的浆液这会加重外植体的褐化,请问应该怎么处理呢?

问:水解酪蛋白有酸水解,有酶水解,在使用过程中有没有区别,他们的在培养基中的作用是一样的吗?
答:水解酪蛋白(CH)和水解乳蛋白(LH)是多种氨基酸的混合物,对胚状体、不定芽的分化有良好的促进作用,通常用量在500mg/L,特别是当有高水平IAA存在时更是如此。对于酪蛋白不管是酸解还是酶解,作用都是一样的,但考虑到组培苗的异养功能,酸解应该更有利于发挥其作用。

问:有些树种受伤后会分泌出一些白色的浆液,比如梓叶槭,不管是茎段还是叶片,只要有伤口的地方都会有浆液,而这会加重外植体的褐化,请问应该怎么处理呢?
答:这是植物的伤流现象。由于伤流液中含有酚类物质,因此在培养中极易引起褐变。许多研究表明,选择适当的外植体和培养条件是克服褐变的最主要手段。通常外植体应有较强的分生能力,在最适宜的细胞脱分化和再分化培养条件下,使外植体处于旺盛的生长状态,便可大大减轻褐变。适宜的温度和在全黑暗条件下进行培养也可显著减小外植体的褐变。液体培养和连续转接也是很好的措施。另外,加入一些氧化剂或用抗氧化剂进行材料(外植体)的预处理或预培养,可大大减轻醌类物质的毒害。这些抗氧化剂包括:VC、柠檬酸、硫代硫酸钠等。此外,0.1%-0.5%活性炭对吸附酚类氧化物的效果也很明显。