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组培知识

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漳州水仙的组织培养技术

一、植物简介
漳州水仙花是水仙花的一种,水仙花江南处处皆有,唯漳州水仙鳞茎硕大,箭多花繁,色美香郁,素雅娟丽,故有“天下水仙数漳州”之美誉。
二、培养条件
鳞茎盘与愈伤组织分化不定芽培养基:MS+6BA10mg/L+蔗糖30g/L+植物凝胶3g/L,生根培养基:1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖15g/L的液体培养基.。光照强度2 000 lx,培养温度为(25±1)℃,每日光照/黑暗时间为16h/8h,其中愈伤组织诱导与继代培养阶段置黑暗处培养。
三、材料与方法
先将鳞茎置于4℃的冰箱预处理1个月,取出后,剥去外层污染的鳞片和坏死的鳞茎盘,然后,用自来水冲洗干净。在超净台上,鳞茎先用75%的乙醇浸泡并搅动1min,再用质量浓度为13g/L的次氯酸钠溶液振荡消30min,无菌水冲洗4-6次后,用无菌滤纸吸干表面多余水分,将消毒好的鳞茎盘的鳞茎基底切成1.0cmx1.5cm大小的块体,置于培养基中进行培养。
四、生长与分化
鳞茎盘不定芽的直接诱导:将切成块的鳞茎盘基底接入到再生培养基中,7d后外植体开始膨大,20d后长出不定芽,40d后不定芽可长至5cm。鳞茎叶和鳞茎盘愈伤组织诱导:分别将鳞茎叶切块、鳞茎盘切块2种外植体接种在愈伤组织诱导培养基上,40d后鳞茎盘切块的出愈率达74.2%愈伤组织状态为浅黄色、致密型;鳞茎叶出愈率较低,只有37.4%愈伤组织状态为浅白色、致密型。愈伤组织不定芽的诱导:将鳞茎盘切块诱导的愈伤组织接种在不定芽诱导培养基中分化出不定芽。生根培养:将高超过3cm的芽切下,转接生根培养基上,20d后调查生根情况。