关键词：钻石玫瑰；组培快繁；培养基；诱导分化
 
钻石玫瑰（Rosasp.），蔷薇科蔷薇属多年生花卉，为微型月季的一种，因其花枝短小，花朵如豆扣般大小，故美其名曰“钻石瑰”或“袖珍玫瑰”。钻石玫瑰除具有一般月季花容秀美、芳香馥郁、四季常开等特点外，还具有分枝多、株型矮小紧凑、耐寒、耐热、适应性强等优点，是现代城市绿化不可替代的材料，深受人们的喜爱。目前钻石玫瑰主要靠扦插繁殖，繁殖率低、速度慢，且后代出现品质降低现象，远远不能满足市场的需求。为此，我们开展了钻石玫瑰组培快繁技术研究，拟用工厂化育苗措施解决常规生产所面临的问题。
 
材料与方法
 
1外植体的建立
供试材料采自重庆市园林绿化科学研究所品种圃从北京引进已栽培驯化2年的钻石玫瑰品种“紫色时代”当年生植株。剪取优良健壮株当年生枝条中段带侧芽的未木质化或半木质化茎段，用毛刷蘸肥皂水轻轻刷洗后流水冲洗1～2h，再剪成1.0～1.5cm 左右带腋芽的茎段；超净台上，将茎段先用 70%酒精溶液浸泡 30s，无菌水冲洗2～3 次，再置于0.1%升汞溶液中消毒 9～12min，然后用无菌水冲洗 3～4 次，以备接种。
 
2离体芽的诱导培养
将无菌茎段接种于诱导培养基上诱导萌芽。诱导培养基以MS为基本培养基，附加不同浓度的细胞分裂素6-BA和生长素NAA，共组成 5 种培养基：
MS+6-BA0.30mg/L+NAA0.10mg/L，
MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L，
MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L，
MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.20mg/L，
MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.10mg/L。
每种培养基均接种20个离体芽,培养6周后统计芽诱导分化率。
 
3丛生芽的继代增殖培养
将诱导培养基上已萌发的嫩芽切下转接到4种继代培养基中继代增殖。继代培养基分别：
MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L，
MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L，
MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L，
MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.20mg/L。
每种培养基接种 30 个嫩芽，接种时单芽茎段长0.5～1.0cm 左右，培养3周后统计丛生芽的数量以及高于 2cm 的芽数。
 
4试管苗生根培养
选取继代培养中生长健壮的丛生芽，剪成1.2～1.5cm长的单芽茎段，转接到生根培养基上。培养基配方为：1/2MS+NAA0.10mg/L，MS培养基中的白砂糖浓度均为30.0g/L，1/2MS 培养基中白砂糖浓度为20.0g/L，琼脂均为3.5g/L，pH5.8，培养室温度23±2℃，光照强度为2000～2500Lx，光照时间10～12h/d。
 
5炼苗移栽
将生根试管苗放在室外光线明亮的地方，闭瓶炼苗2～3d，再逐渐开瓶炼苗2～3d，让植株经受试管外环境的锻炼后取出试管苗洗净基部粘附的培养基，移植于珍珠岩：腐殖土：炉杂为 1：3：3 的基质中，浇浓度为0.8g/kg 多菌灵溶液，遮荫保湿，空气湿度保持在 60%～70%，当植株萌发新根后让其逐渐见光，并降低湿度，直至暴露在外界条件下，移栽成活率可达 75%～80%。