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组培知识

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花叶络石组培快繁技术(二)

2、材料类别
当年生新梢。
3、培养条件
基本培养基为MS。
(1)诱导休眠芽萌动培养基:
MS+NAA0.05mg/L+6BA2.0mg/L;
(2)芽增殖培养基:
MS+IAA0.2mg/L+6BA1.5 mg/L;
(3)壮苗培养基:
MS+NAA0.5 mg/L +6BA0.5 mg/L;
(4)生根培养基:
l/2MS+NAA0.5 mg/L+IBA0.2 mg/L。
以上培养基均附加20g/L蔗糖、7g/L 琼脂,pH6.0-6.2;光照度为 2000~2500lx,每天光照14h;培养温度白天为 25~30℃,夜间为 15~20℃。
4、生长与分化情况
4.1无菌材料的获得
选取一年生幼苗生长健壮无病虫害的母株,切取当年萌发之春梢先端,去除叶片,保留叶柄,将枝条截成2-3cm的小段。消毒时先用10%洗衣粉溶液浸泡15min,然后用流水冲洗30min。在无菌条件下用75%乙醇溶液浸泡杀菌30s,用0.1%的升汞溶液加吐温-20杀菌3、5、10、15min。0.1%升汞溶液灭菌效果随杀菌时间延长而提高,杀菌时间少于10min 则无菌苗获得率小于13.5%,杀菌15min无菌苗获得率为23.7%,外植体死亡率达33.3%。随着杀菌时间的延长升汞对植物材料的毒害作用加剧,以0.1%升汞溶液杀菌时间10-15min 为宜。用无菌水冲洗3-5遍后,接种到 MS固体培养基上。