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组培知识

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十二卷类植物的组培技术研究


1.植物简介
十二卷(Haworthia fasciata)类植物属于百合科十二卷属,是多年生多肉类常绿草本,全属约有150余个种,世界各地广泛分布,我国华南、西南地区的热带、亚热带地区亦有分布。
2.培养条件
诱导培养基:MS+2mg/L BA+0.2mg/L NAA;
增殖培养基:MS+1~2mg/L BA+0.1~0.2mg/L NAA;
生根培养基:1/2MS+0.2mg/L NAA。
培养基中蔗糖30g/L、琼脂6g/L、pH值5.8。培养室温度25℃,24h恒温,每天12h光照,光照强度35μmol/㎡/s左右,生根培养基中蔗糖浓度为20g/L。
3.材料与方法
于5~6月间选取春季叶丛中抽生的幼嫩花枝作外植体(标准为枝条柔软,顶部花蕾少量开放),从基部剪下并剪去顶部幼嫩部位及基部老熟部位,用洗涤剂清洗2遍,用干净纱布包裹后置自来水龙头下用流水冲洗4h后沥干备用。在无菌室超净台上用“三步法”进行消毒,第一步,用75%酒精消毒1min;第二步,用1:50洁尔敏消毒20min;第三步,用10%次氯酸钠滤清液消毒15min,无菌水冲洗3遍,用无菌滤纸吸干。
4.生长与分化
在超净台上将消毒的花枝切成长1~1.5cm的茎段,接种于发生培养基上,经过约90d左右的培养,无菌芽长出,进入继代增殖阶段。待无菌芽形成丛生芽,高度1.5cm 以上,每株有2~4个芽,即转入生根培养。
5.炼苗移栽
先将瓶苗放置室内光亮处常温下炼苗24h,第2天用镊子轻取幼苗,在清水中漂净根部培养基,移至塑料温室大棚苗床上炼苗驯化。炼苗基质为泥炭+珍珠岩+蛭石,三者配比1∶1∶1。