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组培知识

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牛皮杜鹃的组培技术研究

1.植物简介
牛皮杜鹃(Rhododendron chrysanthum Pall),又称牛皮茶,是一种常绿小灌木,喜温暖湿润的半阴环境,花、叶兼美,地栽盆栽皆宜,是一种极具观赏价值的花木。
2.培养条件
诱导培养基:1/4MS+6-BA2.5mg/L+NAA1.0mg/L+3%蔗糖;
分化培养基:1/4MS+6-BA4.0mg/L+NAA0.5mg/L+3%蔗糖;
继代培养基:1/4MS+6-BA3.5mg/L+NAA0.2mg/L+3%蔗糖;
生根培养基:MS+IAA0.1mg/L+1%蔗糖。
上述培养基均添加0.9%的琼脂,pH5.4,培养温度为(26±2)℃,光照强度为20μmol•m-2•s-1。
3.材料与方法
7月中旬,取牛皮杜鹃的新萌发的嫩芽,在超净工作台上用70%的酒精洗3min,再用5%的青霉素溶液浸泡10min,用无菌水冲洗10次,用无菌滤纸吸干表面的水分,切除被杀菌消毒剂损伤的部分,然后将其接种到诱导培养基上进行培养。
4.生长及分化
诱导培养基中大约45d后嫩芽基部脱分化形成愈伤组织,将嫩芽产生的愈伤转接至分化培养基中继续培养70天左右,愈伤组织分化出芽苗,将带有芽苗的愈伤组织切割成小块,转接至继代培养基中。将生长健壮的丛生芽切下转移至生根培养基中培养。
5.炼苗及移栽
壮苗生根后将组培苗从培养瓶中取出,用含有3mg/L的多菌灵溶液洗去苗上残留的培养基,然后植入100倍杀毒矾消毒过的腐烂松针、泥炭土和细河沙为2:1:1的混合基质中,用透性好的塑料薄膜覆盖以保湿、保温,湿度保持在85%,温度控制在(18±2)℃,自然光照8h/d。
6.意义
牛皮杜鹃是国家三级重点保护植物,也是上好的观赏园艺品种,还是水土保持的好植物,由于人们的乱采乱挖,野生资源受到了极大的威胁,其种子细小,萌发率低,扦插繁殖生根率低,组织培养可以提高其繁殖率,具有重要意义。