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组培知识

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氯化汞防治组培苗污染的研究

 
  
  组织培养是提高种苗繁殖系数的一个重要手段,在生产上得到越来越广泛的应用,但是在外植体初代培养到继代培养过程中,均易出现污染,并且污染后的组培苗生长缓慢,甚至死亡。这种现象尤其是对一些名贵材料资源的保存,造成无法挽回的损失,同时也会贻误组培苗的生产用苗。
  组培污染一般由二方面原因造成,一方面是材料内部带菌所引起的污染,这种污染不能被一般的消毒方法所清除,在继代培养中意义不大,只能被淘汰。另一方面是组织培养过程中操作不当引起污染,并且随着继代培养的时间延伸,污染率不断增加,甚至无法控制。因此,控制污染是植物组培苗工厂化生产中重要的技术环节。
  对于组培苗污染防治,科研人员做了大量的研究。于福科等在玫瑰组培污染防治研究中发现,污染的组培苗,尤其是由内源细菌引起的污染,用表面消毒方法不能彻底消除,但可通过在培养基中加入抗菌剂来防治。周俊辉等对细菌抑制的研究表明,丙酸钠、磷酸钠均能耐高温高压,0.3%的丙酸钠有较好的抑菌效果,在应用于美铁芋的快速繁殖上,发现0.5%的丙酸钠对外植体的生长影响不大。许婉芳等将多菌灵添加到金线莲培养基中,起到较好的抑菌促生作用。在组培育苗过程中,将广谱杀菌剂氯化汞添加在培养基中能否起到较好的污染清除效果呢?现以大花萱草和切花菊为试材,研究氯化汞对组培污染的防治效果。
1.材料与方法
1.1试验材料
试材为大小一致的大花萱草与切花菊组培苗。大花萱草组培苗已出现污染但尚未出现腐烂水渍状,切花菊组培苗为无菌、长势良好苗木。
1.2试验方法
试验共设5个处理,每个处理5瓶,3次重复,同时安排空白处理。在MS基本培养基中,添加适宜的激素,调节其pH5.8。在此基础上,分别添加浓度为0.005、0.010、0.030、0.050、0.070mg/L氯化汞溶液。将选取的大花萱草组培苗直接转接到已备好的培养基中。切花菊组培苗分株,蘸取适量枯草菌,再转接到已备培养基上,每瓶3株。培养条件:温度24℃、光照强度2000~3000lx、光照时间12h/d。
2.结果分析
2.1不同浓度氯化汞对大花萱草的抑菌效果
不同浓度的氯化汞对大花萱草组培苗污染产生不同的抑制效果,对照处理3d后开始出现可见污染。在0.005~0.070mg/L浓度范围内,随处理浓度增加,消除污染的能力逐渐越强。氯化汞浓度为0.050mg/L时,经过1次接转处理后污染基本可以消除。而氯化汞浓度为0.030mg/L时,需经过2次接转,污染才能消除。虽然氯化汞的浓度越高抑菌能力越强,但是当浓度超过0.008~1.000mg/L时,导致组培苗短时间内脱绿死亡。在0.050~0.070mg/L范围内除污效果好。
2.2不同浓度氯化汞对切花菊组培苗的抑菌效果
氯化汞对切花菊组培苗消除污染效果。虽然氯化汞对切花菊组培苗的抑菌效果与大花萱草相似,但同种浓度氯化汞对切花菊组培苗的消污效果不及大花萱草,分析其原因,大花萱草组培苗的生长势比切花菊强,抵抗污染的能力也强。氯化汞浓度在0.005~0.030mg/L时,切花菊苗分别培养3、5、7d后,其污染率略高于同种处理的大花萱草苗,菌落直径稍大,长势也较差。当氯化汞浓度增加到0.050和0.070mg/L时,对污染的清除效果比较理想。
3.结论
在防治组培苗被污染的过程中,抗菌剂浓度的选择非常重要,浓度低了效果差,而浓度高又容易对作物产生 毒 害。该 研 究 发 现,氯 化 汞 浓 度 在0.050~0.070mgL,对大花萱草和切花菊苗的抑菌效果最好,对苗木的生长无大的不良影响。植物组织培养中污染现象经常发生。因此,在组织培养操作过程中每一步都要严格按照无菌操作程序进行,将其贯穿始终。虽然抑菌剂能降低污染的发生,但控制污染是关键。