1.植物简介
知母Anemarrhena asphodeloidesBunge为百合科知母属(单种属)多年生宿根植物,广布温带地区,多为野生。
2.培养基
分蘖芽增殖培养基:MS+KT 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L;
分蘖愈伤组织诱导培养基:MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;
愈伤组织再分化培养基:MS+KT 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L;
生根培养基:1/2MS+NAA 0.5 mg/L。
3.材料与方法
选取无病虫害、健壮饱满的种子用饱和洗衣粉浸泡20min左右,取出后再用自来水反复冲洗数次,接着先用75%酒精处理30s后,然后用无菌水冲洗3-4次;再用0.1%升汞处理15min,用无菌水冲洗3-4次,用灭菌的滤纸将种子多余的水分吸干,将种子接种到1/2MS固体培养基上。
4.生长与分化
从知母的无菌苗上切取1.5-2.0cm带芽的分蘖接种至增殖培养基上,光照强度为1000-2000lx,过一段时间从增殖培养基上切取0.5-1.5cm带芽的分蘖,接种于愈伤诱导培养基上,黑暗培养,继代两次后接种于愈伤组织分化培养基上,光照强度1000-2000lx,待苗子长至一定高度后即可进行生根培养。
5.炼苗移栽
生根培养30d后,在自然光下闭瓶炼苗3d,再打开瓶口炼苗3d,然后洗去组培苗根部附着的培养基,即可移栽到培养钵中。
6.意义
目前国内对知母的组培技术研究较少,本试验的研究为今后试管苗的工厂化生产提供理论依据和技术基础。