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组培知识

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枳椇的组培与快繁技术

1.植物简介
枳椇(Hovenia acerba Lindl.),又名拐枣、金钩梨、万寿果、金钩子、鸡爪梨等。
2.材料与方法
取刚发芽不久的细嫩叶片,加适量洗涤剂仔细刷洗,再用流水冲洗 0.5-1.0 h 后,在超净台上将叶片转入0.2% 升汞溶液内消毒5-6min,用无菌水冲洗 4-5 次, 然后将叶片切成 1.5cm×1.5 cm 的小块,接种到愈伤组织诱导培养基上培养。
3.培养基
诱导培养基: (1)1/2MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L;
增殖培养基: (2)1/2MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L;
生根培养基: (3)1/4MS+NAA0.1 mg/L。
1/2MS 为大量元素减半;1/4MS 为 1/2MS 各元素减半且不添加肌醇。培养基(1)、(2)均添加1.5 g/L聚乙烯吡咯唍酮(PVP)。培养温度为(25±1)℃; 光照强度为30-40 µmol·m-2·s-1,光照时间为 14 h/d。
4.生长与分化
培养 15-18d后叶片切口处开始出现愈伤组织,30d时愈伤组织诱导率达90%以上,但愈伤组织容易褐化,可以采取在培养基内添加1.5% PVP 和 15 d 继代 1 次的方法以减轻褐化。在继代3-4次后,将生长良好的愈伤组织转入分化增殖培养基上待丛生芽长至 1cm时,可切下继续进行增殖培养,诱导更多的芽。待苗高3-4 cm时,切取长势好的无根苗,将其转接到生根壮苗培养基上进行生根诱导。
5.炼苗移栽
待根数超过5条且苗高有了明显增高时,微开培养瓶盖进行炼苗,1d后取出并洗净根部附着的培养基,移入小粉土中。初期可在苗上方罩一烧杯以保持湿润,10d后可带土移栽入大田。
6.意义
枳椇为落叶乔木,目前多为野生状态,由于种子不易发芽, 野生成林极为罕见。它对土壤和气候要求不严,生长速度快,可作为绿化、退耕还林和水土保持的树种。采用组织培养技术,可在短期获得大量种苗,对于种质资源保护及开发利用有一定的参考价值。