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组培知识

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山莓的组培技术研究

1.植物简介
山莓(Rubus corchorifolius L. f.)又名树莓、刺葫芦等,是蔷薇科悬钩子属的一种直立灌木,多生在向阳山坡、山谷、荒地、溪边和疏密灌丛中潮湿处,目前尚未由人工引种栽培。
2.外植体材料
休眠芽(取秋季落叶后防寒之前生长健壮的枝条,放入0-4℃的冰箱内保存60天)备用。
3.培养基
(1)启动培养基:MS+ 6-BA 0.6 mg/L;
(2)增殖培养基:MS+ 6-BA 0.4 mg/L+ IBA 0.08 mg/L+ GA3 0.6 mg/L;
(3)生根培养基:1/2MS+ IBA 0.5 mg/L。
以上培养基均附加蔗糖30g/L(生根培养基加20g/L)/琼脂6g/L、pH5.8。光照强度为1500-2000lx,温度(25±1)℃,光照时间为14h/d。
4.外植体消毒
(1)取山莓的休眠枝条,剪成单芽茎段,用洗衣粉洗净,然后用自来水冲洗30min;
(2)在超净工作台上用70%的酒精浸泡1min,然后用0.1%的升汞浸泡10min,用无菌水冲洗3-4次;
(3)剥掉芽外部的鳞片,切取芽体,将芽接种于培养基(1)上。
5.分化及生长
在启动培养基上约6天后芽开始膨大,并且绿色开始加深,约一个月后原芽周围开始产生丛芽,然后将丛芽切成1cm左右带1个芽的茎段,接种于增殖培养基上,当丛生芽长至2cm左右、带有2-3片叶时,可将茎段接种于生根培养基上。
6.炼苗移栽
当试管苗的不定根长至1cm左右,高3-4cm时,先在温室中放置一周,再从瓶中取出小苗,将其根部的培养基洗净,移栽于草炭:蛭石:田园土为1:1:1的基质中,基质用0.1%的高锰酸钾溶液处理,将苗移栽到穴盘中,用遮阳网进行遮光、保湿。
7.意义
山莓果实色美味香,口感独特,不仅可以加工成果汁、果酒等食品,还可以用于制药、保健、化妆品的生产,具有极其广泛的应用前景,本文利用休眠芽为外植体,探讨建立离体培养无性繁殖体系,以期望为实现山莓优良苗木的工厂化生产奠定基础。