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组培知识

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番茄的组培技术

1.植物简介
番茄(Lycopersicon esculentum Mill)是一种重要的世界性蔬菜,具有很高的经济价值和科学价值,深受人们的喜爱。
2.材料
‘浙杂905’、‘圣亚‘、‘富丹’的子叶、茎段。
3.培养基
(1)子叶最佳再生培养基:为MSB5+3%蔗糖+0.6%琼脂+BA 2.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L(pH 5.8)
(2)茎段最佳再生培养基:MSB5+3%蔗糖+0.6%琼脂+BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L(pH 5.8)
(3)生根培养基: 1/2MS+NAA 0.1 mg/L +IBA 0.5 mg/L(pH5.8)
4.无菌苗的获得
番茄种子先用70%的酒精消毒1min,然后用2%的次氯酸钠消毒10min,无菌水冲洗3-5次。无菌条件下接种于1/2MSB5+1%蔗糖+0.6%琼脂,pH 5.8的培养基上。先放入恒温培养箱25-28℃黑暗条件下发芽,出芽后置于光照培养箱内。培养条件为光照16h,光照强度为1600-1800lx。
5.分化与生长
在番茄苗龄为4天时,选取番茄的子叶或者茎段作为外植体,将子叶切去叶尖。叶柄,其余部分切成0.5cm×0.5cm大小的子叶块,茎段切成长度约为6-8cm的切断,分别接种于培养基(1)(2)上培养。待不定芽长至月1-2cm时,将不定芽剪下接种于培养基(3)上,等番茄生根后即可进行炼苗移栽。
6.意义
番茄试是最早进行基因转化研究的高等植物之一,并且已经获得抗病毒、抗虫、延长贮藏期等转基因番茄,番茄的组织培养在番茄遗传转化领域发挥着重要的作用,是优化番茄再生体系的关键,番茄再生系统的建立是成功进行遗传转化的的前提和保障。