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组培知识

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沙拐枣的组培技术

1、植物简介
沙拐枣(Calligonum mongolicum Turcz),为廖科沙拐枣属的灌木或半灌木,对流沙、风蚀戈壁具有较强的适应能力,是我国西北干旱地区固沙、绿化的优良树种。
2、外植体材料
由种子获得的小苗茎段。
3、培养条件
(1)诱导培养基:MS+ 6-BA 0.05 mg/L+ IAA 0.01 mg/L;
(2)增殖培养基:MS+ 6-BA 0.4 mg/L;
(3)分化培养基:MS+ 6-BA 0.4 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L;
(4)继代培养基:MS+ 6-BA 0.05 mg/L+ IAA 0. 1 mg/L;
(5)生根培养基:MS+ IAA 0. 1 mg/L。
以上培养基中均附加2.0%蔗糖和0.55%琼脂,pH 5.8-6.0,培养温度为25-27℃,光照时间为12h/d,光照强度为30-40μmol•m-2•s-1。
4、外植体消毒
(1)将由种子获得的小苗剪成1.5-2.0cm长的小段;
(2)用75%的酒精灭菌3-5s,无菌水冲洗一次;
(3)用0.15%的升汞消毒10min,无菌水冲洗5-6次,然后将外植体接种到诱导培养基上。
5、分化及生长
外植体生长5-10天后在剪口处有翠绿色的愈伤组织产生,待愈伤长至黄豆大小后转至增殖培养基进行培养;1-2周后产生大量愈伤,呈翠绿色,将其转至分化培养基;10-15天后有丛生芽长出,将经分化得到的丛生芽剪成1.5-2.0cm的小段接种于继代培养基上;将经继代所得丛生芽剪成1.5-2.0cm长的小段转入生根培养基中,约8天后就有根长出。
6、炼苗及移栽
先将高5cm、具有3-5条主根的试管苗带瓶逐步移到有散射光的自然环境中炼苗1周,打开瓶盖炼苗3-4天后将苗从瓶中取出,洗净根部培养基,移栽到蛭石:珍珠岩=1:1的基质中,在温度为25℃、空气相对湿度为80%的温棚中培养。
7、意义
由于沙拐枣所处的生长环境中水分的时空分布不均匀,导致其种子的发芽成苗率极低,大部分种类主要靠根蘖进行无性繁殖,导致群落内和群落间遗传多样性水平以及群落的稳定性不高,因而降低了其抵御自然灾害的能力,群落的天然更新能力受到了一定的限制。采用生物技术手段可以加快其繁殖速度,可为西北干旱地区的绿化提供大量的苗木。