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霸王的组培技术
1 植物简介
霸王[
Zygophyllum xanthoxylum
(Bunge) Maxim]是蒺藜科霸王属落叶沙生灌木,平均株高70cm,抗风沙、耐干旱,适应性极强,是我国西北干旱荒漠区重要的超旱生小灌木和灌木。
2 外植体材料
当年生的健壮枝条。
3 培养条件
(1)芽诱导培养基 MS+ 6-BA 0.5mg/L (单位下同)+ NAA 0.01 mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂;
(2)继代增殖培养 MS+ 6-BA 0.3 mg/L+ NAA 0.5 mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂;
(3)生根培养基 MS+ IAA 1.0 mg/L+ 1.5%蔗糖+0.6%琼脂。
以上培养基的pH均为5.8-6.0。培养温度(26土l)℃,光照时间12h/d,光照强度40μmol/m
2
/s。
4外植体消毒
(1)取当年生健壮枝条,自来水冲洗表面20min。将茎节切成约2cm的茎段,每段一芽;(2)将冲洗干净的外植体放入无菌瓶中,用75%酒精浸泡30s,再用无菌水冲洗1次;
(3)再用0.1%升汞溶液(加l-2滴吐温-20)消毒15min,然后用无菌水冲洗5次,用消毒滤纸吸干表面水分,将外植体接种到芽诱导培养基上。
5 增殖与分化
在芽诱导培养基上约7d后,外植体开始萌发;15d后,可有新芽抽出。约1个月后,将诱导长出的新芽转接到增殖培养基上,20d后不定芽产生。4Od后,5-6个芽体长至5-6cm时,少数开始生根,此时可转瓶剪段在增殖培养基中继续扩繁。将嫩茎剪成1.5-2cm小段,接入生根培养基中进行培养,约20d长出不定根,30d后多数试管苗生3-5条根,生根率85%。
6 炼苗与移栽
将高5cm和带有3-5条根的试管苗,连瓶逐步移到散射光的自然环境中炼苗1周,而后从瓶中取出,于35℃以下以温水洗净根部培养基,用72穴育苗盘装腐殖质基质进行移栽,在智能温室中,育苗盘放在育苗床上,相对湿度控制在85%,温度控制在26℃,进行培养炼苗,成活率达85%以上。
5 意义
近年来,随着兰州市及周边地区生态建设的不断深入和生态造林面积的不断扩大,昂贵的管护费用成为制约生态建设的因素。选用当地适生种霸王并推广应用,可以在自然条件下一次成苗生长,省去过多的管护费用,具有非常重要的生态价值。采用组织培养技术,可为其工厂化育苗提供可能,也为深入研究霸王的生理生化提供材料。