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组培知识

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百里香的组织培养

1植物名称  百里香(Thymus serpyllum.Var mongolicus Ronn)。
2材料类别  顶芽和腋芽。
3培养条件  (l)芽诱导培养基:MS基本培养基;(2)增殖培养基:MS+6-BA1.5mg.L-1(单位下同)+IBA0.1+0.6%琼脂+3%蔗糖;(3)生根培养基:l/2MS+IBA0.5+0.7%琼脂+2%蔗糖。以上所有培养基均为pH5.8-6.0,培养温度(24士2)℃,光照度40-60μmol•m-2•s-1,光照时间15h·d-1。
4生长与分化情况
4.1无菌材料的获得  在生长良好健壮、无病虫害的优良母株上剪取均匀大小的顶芽和腋芽,冲洗表面,再用洗涤灵水浸泡摇晃10-15min,再冲洗30min,在无菌条件下用70%一75%酒精消毒30~60s,再用0.1%HgC12+80%吐温浸泡8min,然后用无菌水冲洗3-5次,切去材料与药液接触伤口,接种于培养基(l)上。15~20d后,基部开始萌动,发出2-4个新芽。
4.2增殖培养  将初代培养萌发的嫩茎剪成单芽茎段接种于培养基(2)内,培养10-15d后基部开始萌动,1周后萌动部分长出丛生芽。当丛生芽长到3-5cm时,可剪下转入新鲜培养基(2)中继续培养,增殖芽数平均达到57,50d为1个继代增殖周期。
4.3生根培养  将继代增殖的生长健壮的嫩茎剪成约1cm长的茎段,接入培养基(3)中。培养25d时,每株平均生根数达到2.0条,平均根长9.5mm,生根率100%。
4.4炼苗与移栽  当幼根在生根培养基上长到2-3cm时,在室温下炼苗2d后,除去玻璃瓶的封口膜继续炼苗3-5d,然后取出组培苗,用自来水洗去除根部的培养基,转入含水量为70%左右的无菌营养土[(河沙+草炭):园土=3:1]中,盖塑料薄膜保湿5-7d,保持温度25℃左右、湿度80%-90%,每天喷水1-2次,中午适当遮阴,半个月后移栽到大田。试验统计,移栽后成活率达到60%以上。
5意义   百里香为唇形科百里香属植物的统称,是世界著名的芳香植物之一,原产于地中海沿岸及小亚细亚一带,目前在世界各地都有栽培,分布于我国河北、山西、陕西、甘肃和青海。本文所用的百里香是百里香属多年生草本状小灌木,草原旱生、中旱生植物,产于我国内蒙古锡林郭勒盟、乌兰察布盟和巴彦淖尔盟。目前,国内百里香主要用作芳香植物提取香精和药用原料,在园林中的应用比较少。