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钻天杨的组织培养与植株再生
1
植物名称
钻天杨(
Populus nigra var. italica
)。
2
材料类别
无菌苗叶片。
3
培养条件
(l)芽分化培养基:MS+TDZ 0.1mg·L-1(单位下同)+NAA 0.01;(2)生根培养基:l/2MS+IBA 0.5;上述培养基中均加入0.7%琼脂和2%蔗糖,pH5.8。培养基在121℃条件下灭菌20min。培养温度为(25土2)℃,每天光照和暗培养16h/8h,光强为50μmol·m-2·s-1。
4
生长与分化情况
4.1
无菌苗的获得
剪取钻天杨当年萌生新枝,切取带腋芽茎段,自来水冲洗30min后,分别在70%酒精中浸泡30s和l%的NaCLO中消毒3~5min,然后接入MS+6-BA 0.2培养基中,获得无菌苗,每4周继代一次。
4.2
不定芽的诱导
取无菌苗叶片,于超净工作台上,剪去叶片边缘,向轴面向下培养在培养基(l)中,7d后叶片切口处有少量淡绿色的愈伤组织形成,半个月左右,大部分外植体的切口边缘有不定芽出现,1个月时便形成不定苗。外植体诱导率达到92%,平均每个外植体的出芽数为18.2。
4.3
根的诱导
挑选生长健壮的无菌苗接种在生根培养基上,10d左右开始有不定根形成,培养3周后开始统计实验结果,平均生根数为5.8条,不定芽的生根率可达95%以上。
4.4
炼苗与移栽
在生根培养基培养1个月后,挑选生长健壮、根系发达的生根组培苗在自然环境下炼苗5d。炼苗结束后,用镊子将试管苗从培养瓶中取出,用流水轻轻冲去根部培养基,移栽到温室含有沙子和土(1:l)基质中。在移栽前2周,生根组培苗用黑色塑料布进行遮荫处理,以防止水分散失而造成小苗枯萎。以后逐渐打开塑料布,移栽4周后,成活率可达90%以上。
5
意义
钻天杨属杨柳科杨属,其在我国长江黄河流域各地广为栽培,可营造防护林,由于其生长速度快,成形快,适栽于城市小区,路边绿化,美化工厂环境等。钻天杨具有耐寒、耐干冷气候等特点,是重要的蜂胶植物。但其抗病能力较差,从而限制了它的利用,采用传统的育种手段无法在短期内解决这一问题。现代生物技术和遗传工程可缩短育种周期。因此若能通过遗传转化手段对其进行遗传改良,提高其抗病能力和改良材质,对提高其利用价值是有意义的。