1 植物名称　　Haworthia　emelyae　var.emelyae V.Poelln, 中文惯称白银寿。
2 材料类别　　成年的白银寿春生花茎子房, 实验材料来源于日本奈良多肉植物研究会。
3 培养条件　　(1)启动培养基: MS+6-BA 2mg·L-1(单位下同)+KT 1+NAA 0.2；(2)叶基分化培养基: MS+6-BA 0.5+KT 2；(3)继代与增殖培养基: MS+6-BA 0.5+KT 1+NAA 0.05；(4)复壮与生根培养基: 1/2MS+DPU(3,3-二苯基脲) 1+NAA 0.2。以上培养基均加入3% 蔗糖和0.6% 聚合胶(polygel), pH 6.0。培养温度为(25±2)℃, 光照时间8h·d-1,光照强度约为60mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得　　选取温室内栽种的成年植株,取其春生花茎上半部花蕾未开放部分(充分保留花蕾子房部)后经流水冲洗30min 以上,超净台上以0.1% HgCl2溶液(pH调至中性后加入0.05% Tween-20)浸泡7min,无菌水再冲洗6次。将消毒的材料置于无菌滤纸上,分离单个花蕾子房部位作为外植体。
4.2 启动培养　　将外植体接入启动培养基(1)上, 30d后,子房部显著膨大但无愈伤组织形成；40d后,子房部继续膨胀,基部有芽形成；60d后,膨胀的子房组织逐渐玻璃化,但其基部的芽丛逐渐形成完整的植株形态,叶片逐渐展开；将芽的叶片逐一剥离并扦插于叶基分化培养基(2)中。
4.3 分化培养　　上述扦插于培养基中的叶片大约经过7d可以在基部形成球状隆起,每片叶子1~10个隆起。20d后这些球状隆起分别分化为芽，分离这些芽接种到继代与增殖培养基上。残余叶片置于原培养基中可以继续产生新的芽,这样每一片母叶可以陆续收获3~4批芽, 平均每片叶子可以获得20~30 个侧芽。同时这样的处理还可以兼顾分化和增殖。
4.4 芽的增殖　　将上述分离获得的芽接种到继代与增殖培养基(3)中,芽会在20d左右生长成型并基部可形成2~3个侧芽,这些侧芽也可以分离再次转入增殖培养基中继续扩增,但增殖倍率较低,为2~3 倍,结合叶基分化芽的方式可以提高增殖倍率。
4.5 壮苗与生根　　在增殖培养基(3)上有典型形态的苗可转入生根培养基(4)中培养1~2个月,同时适当辅助散射日光,待苗健壮并出现明显成株形态时即可移栽(此时幼苗的新生叶片顶端可以形成此品种所特有的白色“窗”,表明壮苗成功),生根率90%以上。生根过程中很难见到丛生根形成,而多数为基部出现1~2条粗大的根或根原基隆起,只要形成根原基的隆起即可移栽成活。
4.6 移栽 　采用日本产颗粒火山岩(赤玉土):稻壳碳(3:1)作为基质,高压灭菌后装入钵。取出开口炼苗2d的出瓶苗,用洗洁精溶液洗去培养基,以0.01%乙蒜素浸泡15min 后置于通风干燥处风干3d后均匀插入移栽的基质中,覆盖塑料薄膜以保湿。每周用0.005% 乙蒜素溶液浇灌一次,逐渐增加光照,1个多月后可见生长。出瓶苗适当风干(干法移栽)对新根萌发有一定的促进作用,且可缓解白银寿组培苗的生理性腐烂还可杀菌,移栽成活率接近100%。
5 意义与进展　　白银寿是百合科瓦苇属的小型多肉植物,原产于南非。植株低矮,叶呈莲座状紧凑排列,叶顶端呈夹杂红色纹路的浓白色,是此品种的典型特征,故名“白银”。它是百合科瓦苇属中非常有代表性的一个种, 同时也是一种非常优秀的杂交亲本。日本园艺家曾以白银寿为亲本进行属内杂交,获得了一系列优秀的杂交后代,具有很高的观赏价值。白银寿有极高的观赏和收藏价值,是植物园和园艺植物爱好者喜欢收集的珍贵植物。由于其繁殖率很低,繁殖大多用分株、叶插和种子繁殖,不易成活且生长缓慢,采用组织培养方法可能是解决此问题的途径。白银寿因其特殊的组培特性,需结合叶基分化和芽增殖双重扩增手段方可提高增殖倍率,这也是解决难分蘖多肉植物的一个组培模式。
 
原文作者：张浩鹏，由易生组培整理。如果您有好的文章，可以发送邮件至：tech@360bio.net，与组培从业人员进行分享。