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组培知识

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云南越桔的组织培养


1 植物名称  云南越桔[Vaccinium duclouxii (Lévl.)Hand.-Mazz.]

2 材料类别  腋芽

3 培养条件  基本培养基为改良的WPM培养基:以水合硝酸钙[Ca(NO3)2·4H2O] 684 mg·L-1(单位同下)KNO3190C10H13FeN2NaO 8 74.3 和盐酸硫胺素0.1代替原WPM培养基中的K2SO4CaCl2FeSO4和乙二胺四乙酸钠(Na2EDTA)。诱导芽萌发及分化培养基:(1) WPM+ZT 0.5;丛生芽的诱导和增殖培养基:(2) WPM+ZT 2.0;生根培养基:(3) 1/2WPM+NAA 0.05。以上培养基均附加2.0% 蔗糖、6 g·L-1琼脂,pH 5.8。培养温度(23±2)℃,光照12 h·d-1,光照强度 40~50μmol·m-2·s-1

4 生长与分化情况

4.1 无菌材料的获得 以当年生休眠枝条的腋芽为外植体,将外植体置于烧杯中,用自来水冲冼30min,再用洗衣粉液清洗5 min,在超净工作台上用75%酒精浸泡30 s,无菌水冲洗2 次,0.1%HgCl2消毒8 min,无菌水冲洗5次,吸干水分。剥去芽鳞,切去基部的受损组织,接种于诱导芽萌发的培养基(1)中。2周后开始萌发;5周后芽长成4~5cm左右的新梢,侧芽同时也萌发出2~4个不定芽。

4.2 丛生芽的诱导和增殖 不定芽形成后,不切割转接于培养基(2)上。经过4周培养,在不定芽基部长出许多小的不定芽,形成不定芽丛。把丛生芽分割成 2~3 个为一丛的芽丛,转接到培养基(2)中进行继代培养,6周左右可继代增殖1次。

4.3 生根与移栽 取继代培养的芽苗转接于培养基(3)中,5周后基部可长出2~41~1.5cm 长的不定根,生根率78%。培养2~3周,打开瓶盖,炼苗3 d,然后从培养瓶中取出,洗去根部培养基,移入蛭石和腐殖土(1:2)混合的基质中,保湿遮阴,成活率可达90%以上。

5 意义与进展  云南越桔属杜鹃花科越桔属植物,为多年生落叶或常绿灌木或小灌木树种,与现在人工栽培的蓝莓是同科同属的植物。越桔是一种新兴的保健水果,在医药、化妆、食用色素和食品加工等方面有广泛用途。越桔果实深蓝色,抗氧化能力名列果蔬之首,对防止人体细胞衰老、预防老年性疾病如心脏病、白内障、癌症、记忆力衰退具有特殊的功效,因而被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一。果实所含的花青素是迄今已被利用的最佳天然色素,加工稳定性高,色泽呈深红、紫红或蓝紫,作为药物或高级化妆品的原料均具有十分广阔的前景。近几年,其鲜果和加工品风靡欧美等发达国家,虽然价格昂贵但仍供不应求。北美地区的产量已远不能满足本地和国际市场的需求,为此荷兰、加拿大、澳大利亚、日本、智利等国家先后引种栽培,现已初具商品产量。我国具有丰富的越桔植物资源,特别是云南分布的种类约占全国的一半。云南越桔是西南地区特有种,仅分布于云南和四川。采用组织培养技术,对保存我国的越桔种质资源和开发利用可能有一定的应用价值。

 

原文作者:云南省农业科学院高山经济植物所和加卫,由易生组培整理。如果您有好的文章,可以发送邮件至:tech@360bio.net,与组培从业人员进行分享。