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影响植物组织培养的因素
1.外植体
适宜的外植体应根据植物种类确定,不仅要考虑到获得外植体的材料来源、器官和组织的类型,同时还需要考虑外植体的大小、生理年龄等。外植体可以是植株上的任何一部份,主要应用的有幼叶、茎尖分生组织、种子、鳞茎、球茎、根茎、花序、茎段等。选取的外植体必须易于消毒,在适宜的培养基上成活率高。
2.培养基的成分组成
培养基组成的各成分,矿物盐、糖、维生素、铁盐、激素和有机附加物都会对快繁过程产生影响,其中以激素类物质影响最大。培养基成分应根据植物的种类、外植体的类别和阶段来确定。在最初的外植体培养中使用较高浓度的生长素或细胞分裂素,在继代培养中激素浓度可适当降低。生芽阶段使用细胞分裂素的浓度高,而在生根阶段使用生长素浓度高等。
3.培养条件
培养条件一般包括温度、光照、气体状况和渗透压等,培养条件同样依不同的植物、不同的培养阶段而不同。就温度而言,大多数培养的植物组织20~28℃即可满足生长所需,其中26~27℃最适合,但也有不少例外。其次是光照,在初代培养一般需要一段时间暗培养,继代繁殖散射光即可,而在生根状苗阶段则需要强光才能形成芽和根。渗透压与植物组织的生长和分化很有关系。在培养基中添加食盐、蔗糖、甘露醇和乙二醇等物质可以调整渗透压。通常1~2个大气压可促进植物组织生长,2个大气压以上时,出现生长障碍,6个大气压时植物组织即无法生存。一般植物组织生长的最适宜pH为5~6.5。在培养过程中pH可发生变化,加进磷酸氢盐或二氢盐,可起稳定作用。