1.无菌室的日常管理和灭菌方式
　　无菌室主要用来接种材料，一般都放置超净工作台。无菌室使用前，用2%的新洁尔灭擦洗，再用70%乙醇喷雾，使空间灰尘落下，最后用紫外灯照射约20分钟，一年中要定期用甲醛和高锰酸钾熏蒸。产生的蒸气熏蒸几个小时，熏蒸时，人不要进入实验室，因为气体会伤害眼睛；熏蒸后空气对流一段时间，人方可进入。要将培养材料保管好，以免气体进入试管内伤害培养物。每次接种前打开紫外灯照射15～20分钟，进行室内空气灭菌，同时将工作服和口罩等一起照射灭菌。
每次接种前，超净工作台用紫外线照射15～20分钟或用75%酒精喷雾灭菌，然后在超净工作台正常送风30分钟后开始接种。

2.如何进行无菌操作
　　首先，要保证接种室的干净整洁，经常对其门、窗、地面用消毒药水进行彻底擦洗，用紫外线对室内空气进行灭菌；其次，要保证超净工作台定期清洗，使之处于良好的工作状态；第三，在无菌操作前20分钟先开启超净工作台，让过滤后的空气吹拂工作台面和四周台壁；第四，工作人员必须穿工作服，操作前用70%酒精擦拭双手和台面，操作过程中也要经常擦拭；第五，操作时打开培养瓶或试管盖子前，要用火焰烧瓶口，由于负压，可以把灰尘固定在瓶口上，以杀死菌类。用硫酸纸或封口膜作封口材料的，应在火焰附近打开盖子；第六，操作时，培养瓶或试管应拿成斜角，既减少灰尘和偶尔存在的细菌落入，又便于操作。

3.培养物污染的原因
　　在组织培养中污染是经常发生的。造成污染的原因也很多，外植体带菌、培养基及器皿灭菌不彻底、操作人员不遵守操作规程等，均会造成污染。为了减少损失，提供工作效率，必须在每个操作环节均注意防止污染的发生。在组织培养实验室中，污染的病原分为细菌和真菌两大类。
　　细菌污染的特点是菌斑呈粘液状物，而且在接种1～2天即可发现。除材料带菌或培养基灭菌不彻底会造成成批接种材料被细菌污染外，操作人员的不慎也是造成细菌污染的重要原因。接种人员的手应经常用70%酒精擦净，镊子、剪刀及手术刀等在使用前必须在火焰上烧红，待冷却后再进行接种。
　　　真菌污染的特点是污染部分长有不同颜色的霉菌，在接种3天甚至10天后才发现。造成真菌污染的原因多为周围环境的不清洁，超净工作台的过滤装置失效，培养用具的口径过大等。