进入生根培养中的小苗已生根成为完整的再生植株,或者虽未生根但已长粗壮,适宜无根扦插,这时便可出瓶种植。试管苗是在无菌、有营养供给、适宜光照、温度和100%的相对湿度环境中生长的,并有适宜的植物激素以调节生长代谢等生理需要。一旦出瓶种植,环境发生了不利于其生长的剧烈变化,比如湿度不再能保持100%,温度也没有培养室那样适宜,失去了营养的支持,移栽的环境可能杂菌丛生等。总之,这么娇嫩的小苗是很难种活的,稍一不慎便会造成大量死苗,使已花费的劳动付之东流。要使试管苗大量种植成活,就应当分析并改善幼苗种植的环境条件,必须尽可能地创造适宜于它生存的环境。
第一,要保持小苗的水分供需平衡。在试管或培养瓶中的小苗,因湿度大,茎叶表面防止水分散失的角质层等几乎全无,根系也不发达或无根,出瓶种植后当然难以保持水分平衡,即使根的周围有足够的水分也不行。所以,只有提高周围的空气湿度(达90%~100%),使叶面的蒸腾减少,尽量接近试管或培养瓶培养中的条件,使小苗始终保持挺拔的姿态。
第二,要选择恰当的种植介质,以利疏松通气,同时适宜的保水性,容易灭菌处理,不利于杂菌滋生等也是选择介质的重要条件。常用粗粒状蛭石(过细的蛭石粉并不适宜)、珍珠岩、粗沙、炉灰渣、谷壳(或谷炭壳)、锯木屑、腐殖土等,或者根据观赏花卉种类的特性,将它们以一定的比例混合应用。管理过程中不要浇水过多,过多的水应迅速沥除,以利根系的呼吸,有助于生根成活。这些介质一般不要重复使用,如重复使用,在使用前应高压灭菌。在种苗的组培快繁工厂化生产中,通常采用微喷设施来保证环境的相对湿度条件。
第三,要防止菌类滋生。试管苗原来的环境是无菌的,出瓶种植环境难以保持完全无菌,但应尽量减少杂菌大量滋生,才能保证试管苗过渡成活。适当使用一定浓度的杀菌剂可以有效地保护幼苗,如百菌清、多菌灵、甲基托布津等,浓度在1/800-1/1000。小苗种好后应立即用喷雾器喷水定苗。
另外为了减少试管苗出瓶操作时对幼苗产生的损伤,新的组培苗出瓶技术无需洗去组培苗上附着的培养基,而直接从瓶中取苗栽植,既省去了一道操作程序,又能进一步提高成活率。
第四,要注意一定的光、温条件。试管苗原来是有糖等营养供应的,出瓶后要靠自己进行光合作用维持生存,因此光照不能太弱,以强度较高的漫射光为好,最好能够调节,随苗的壮弱、喜光或喜阴、种植成活的程度而定。约在1500~4000lx甚至达l0000lx之问。光线过强会使叶绿素受到破坏,引起叶片失绿、发黄或发白,使小苗成活延缓。过强的光线还能刺激蒸腾作用加强,使水分平衡的矛盾更加尖锐,容易引起大量死苗。
小苗种植过程中温度要适宜。这要看植物种类,喜温植物如花叶芋、花叶万年青、巴西铁树、变叶木等,以25℃左右为宜;喜冷凉的植物如文竹、香石竹、满天星、情人草、非洲菊、倒挂金钟、菊花等以18~20℃为宜。温度过高会导致蒸腾作用加强,水分失衡以及菌类滋生等问题;温度过低使幼苗生长迟缓或不易成活。如果能有良好的设备或配合适宜的季节,使介质温度略高于空气温度2~3℃,则有利于生根和促进根系发育,提高成活率。采用温室地槽等埋设地热线或加温生根箱种植试管苗,也可以取得更好的效果。
在规模化生产的过渡培养温室内,配置调温、调湿、调光、通气设施,虽然投资成本较大,但可保障过渡组培苗的成活率。在管理措施完善的单位,一般都能在3~5年内收回投资,与条件差的过渡环境相比可获得更好的经济效益。