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组培知识

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春兰组织培养与快速繁殖技术

春兰属兰科兰属植物,中国人传统上所说的兰花,大都指春兰,是我国兰花栽培历史最为悠久的种类之一。我国自唐代开始就载培此类兰花,是世界上最早种植和拥有最多爱好者的国家。兰科植物有重要观赏价值,社会需求量大,由于长期无节制的乱采滥挖,野生资源已枯竭, 现在不仅已列入国家的珍惜濒危植物加以保护,还且还收载于国际贸易公约(CITES)附录二中,受到国际保护。春兰常用种子和分株法繁殖,其种子在自然条 件下极难萌发,自然繁殖率低。采用组织培养的方法快速繁殖,能解决春兰繁殖困难和种苗缺乏的问题,短期内可以提供大量种苗。

植物名称:春兰

材料类别:种子

培养条件:

春兰种子萌发培养基:(1)1/2MS;(2)1/2MS+100ml/L椰乳;(3)MS;(4)MS+100ml/L椰乳;(5)1/2MS+NAA0.5mg/L(单位下同)+100ml椰乳;(6)MS+NAA0.5+100ml/L椰乳。

原球茎继代增殖培养基:(8)MS+KT1.5+IBA0.2+100ml/L椰乳;(9)MS+6-BA0.5+NAA0.2+100ml/L椰乳;(10)MS+6-BA2.0+NAA0.2+100ml/L椰乳。

壮苗及生根培养基:(11)3g/L花宝1号+IBA0.5+2g/L活性炭;(12)3g/L花宝3号+IBA0.5+2g/L活性炭。

以上培养基均加2.0%蔗糖,0.6%琼脂,PH5.2-5.4,培养温湿度(25±2)℃,光照度1500-2000lx,光照时间12h/d

生长与分化情况:

1、材料的无菌处理

人工授粉180d的荚果经自来水洗净后,至于10%次氯酸钠溶液中消20min,用70%的酒精表面消毒30s,再以0.1%的升汞溶液消毒15min最后用无菌水冲洗5次。将洗净的成熟荚果置于灭菌滤纸上吸干水分,用解剖刀切开荚果,将种子接种到培养基上。

2、种子萌发

发育180d的种子分别接到萌发培养基(1)-(6)上,暗培养2周后,可见白色圆球体出现,转入光下培养,3周后原球茎转绿,8周后原球茎上长芽。培养基(1)-(4)发芽率相差不大,都在40%左右,且培养一个月后发现部分原球茎褐化死亡;培养基(5)、(6)上萌发速度和生长速度快,萌发率达60%以上,表明激素NAA对种子萌发有促进作用,MS培养基较1/2MS培养基更有利于春兰种子生长发育。

3、原球茎继代增殖

将初代培养的原球茎和芽分别在培养基(7)、(8)、(9)、(10)上继代增殖培养,培养基(7)、(8)上原球茎大多形成植株增殖速度慢;培养基(9)、(10)上原球茎增值速度快,增值效果好,60-70d能继代增殖一次。由此可见,生长NAA和细胞分裂素6-BA组合是原球茎增值的主要因素;生长素IBA和细胞分裂素Kt组合增值效果不理想,但球茎可形成植株。

4、生根培养

将较大的无根苗转入生根培养基(11)、(12)上培养,生根率达90%以上,植株生长旺盛,7周后形成3-5cm的小苗,培养基(12)比培养基(11)根系发达,因此说花宝3号好于花宝1号,因而生产中常采用(12)作为生根壮苗培养基为宜。

5、移栽

将培养瓶至于温室中炼苗两周后从培养瓶中取出生根苗,洗净附着的培养基,将水苔用1000倍多菌灵溶液浸泡1h,挤干水分,包裹出瓶苗根部,种植于穴盘中。管护中保持资助适度温度,置于阴凉通风处栽培,期间不要浇水,有利于新根生长和防治病害发生,3周后移入温室中栽培,进行正常水、肥、药管理,成活率90%以上。