在植物组织培养过程中，用于初代培养的外植体，在培养前，必须经过严格的表面灭菌处 理，获得无菌材料后才能进行培养。实践证明，外植体材料来源于不同环境条件下，其带菌程度不同，灭菌难易程度和灭菌效果有明显差别。用于外植体表面灭菌的 灭菌剂有许多种，但在具体工作中选择灭菌剂必须遵循以下原则：既要有良好的灭菌作用，又要不会损伤外植体材料或较少损伤材料，还要易被无菌水冲洗掉或能自 行分解，不会遗留在培养材料上而影响生长。
　　常用的灭菌剂有酒精（70%）、氯化汞（0.1%-1%）、次氯酸钠溶液 （0.5%-10%）、漂白粉（1%-10%的滤液）、过氧化氢（双氧水）（3%-12%）、次氯酸钙（9%-10%）等。其中次氯酸钠能分解产生具有杀 菌作用的氯气而挥发。过氧化氢溶液会分解产生具有杀菌作用的氧气而成无害的化合物。氯化汞有剧毒，对材料的表面灭菌效果好，只是灭菌后较难除去残留的汞， 为此灭菌后要多次冲洗，氯化汞的毒害作用不像漂白粉那样可以很快表现出来，一般要经过一段时间培养后才会表现。漂白粉是一种有效的杀菌剂，但应避光、干燥 保存。70%的酒精比其他浓度的酒精有更强的杀菌能力和穿透力，而且有湿润作用，可排除掉材料表层组织的空气，利于其他灭菌剂的渗入，由于70%酒精穿透 力强，故应掌握好处理时间。
 

灭菌剂	使用浓度 （%）	去除的难易	灭菌时间 （min）	效果
氯化汞（升汞）	0.1～1	最难	5～15	最好
次氯酸钠	2	易	5～30	很好
次氯酸钙	9～10	易	5～30	很好
漂白粉	饱和溶液	易	5～30	很好
过氧化氢（双氧水）	10～12	最易	5～15	好
溴水	1～2	易	2～10	好
酒精	70～75	易	0.2～2	好
硝酸银	1	较难	5～30	好
抗生素	4～50（mg/l）	中	30～50	较好

　　表面灭菌剂对植物组织也是有毒的，使用灭菌剂的目的是去除外植体表面的微生物，不能伤害植物组织。因此，应正确选择灭菌剂的浓度和处理时间，以尽量减少组织的损伤和死亡。通常需要注意以下三个方面：
(1)选择合适的灭菌种类  要考虑灭菌效果，也要摸索灭菌时间，最好选择灭菌效果好，又容易被去除的灭菌剂。使用灭菌剂后，一定要用无菌水多次漂洗，否则留在组织上的灭菌剂会影响外植体的生长。
(2）考虑不同材料对灭菌剂的耐力  不同种类的外植体，或处于不同生理状态的同一种的外植体，对灭菌剂产生的反应不同。
(3）任何一种灭菌剂对不同材料如叶片、茎段和根部，浸泡时间和浓度是不同的，对任何一种外植体使用灭菌剂灭菌时，需要做筛选试验，以确定合适的灭菌剂和使用浓度及时间，才能达到灭菌的效果。