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枳椇的组织培养与快速繁殖技术

植物名称:枳椇(Hovenia acerba Lindl.), 又名拐枣、金钩梨、万寿果、金钩子、鸡爪梨等。

材料类别:叶片。

培养条件:
愈伤组织诱导培养基:(1) 1/2MS+2,4-D 2.0 mg•L-1(单位下同)+6-BA 0.5。

分化增殖培养基: (2)1/2MS+6-BA2.0;(3)1/2MS+6-BA2.0+NAA0.1。

生根壮苗培养基: (4) 1/4MS;(5) 1/4MS+NAA0.1;(6) 1/4MS+NAA 0.5。

1/2MS为大量元素减半,1/4MS为1/2MS 各元素减半且不添加肌醇。培养基(1)~(3)均添加1.5g.L-1聚乙烯吡咯唍酮(PVP)。培养温度为(25±1)℃;光照强度为30~40 μmol•m-2•s-1,,光照时间为14 h•d-1。

生长与分化情况
愈伤组织的诱导:取刚发芽不久的细嫩叶片,加适量洗涤剂仔细刷洗,再用流水冲洗 0.5~1.0 h后,在超净台上将叶片转入0.2%HgCl2溶液内消毒5~6min,用无菌水冲洗 4~5 次,然后将叶片切成1.5cm×1.5cm的小块,接种到愈伤组织诱导培养基(1)上培养。培养 15~18d后叶片切口处开始出现愈伤组织,30d时愈伤组织诱导率达90%以上,但愈伤组织容易褐化,可以采取在培养基内添加1.5%PVP和15d 继代1次的方法以减轻褐化。

不定芽的诱导和增殖:在继代3~4次后,将生长良好的愈伤组织转入分化增殖培养基(3)和(4)上,转后13d左右出现芽点,并不断长大,形成芽丛,25d时的不定芽诱导率分别为63%和77%。待丛生芽长至1cm时,可切下继续进行增殖培养,诱导更多的芽。

生根壮苗培养:待苗高3~4cm时,切取长势好的无根苗,将其转接到生根壮苗培养基(4)~(6)上进行生根诱导。6~8d在培养基(5)和(6)上首先生根,比培养基(4)上的早2d左右。18d 时生根率均达100%,但以培养基(4)上的根最长细,培养基(6)上的为最短和粗且根很少扎入培养基。

炼苗移栽:待根数超过5条且苗高有了明显增高时,微开培养瓶盖进行炼苗,1d后取出并洗净根部附着的培养基,移入小粉土中。初期可在苗上方罩一烧杯以保持湿润,10d后可带土移栽入大田。培养基(4)和(5)上生根的幼苗移栽成活率超过 95%,培养基(6)上生根的幼苗移栽成活率约为70 %。

意义与进展
枳椇为鼠李科(Rhamnaceae)枳椇属的落叶乔木,分布于长江流域以南各地及河南、甘肃、陕西等省。它对土壤和气候要求不严,生长速度快,可作为绿化、退耕还林和水土保持的树种;木材纹理粗而美观,材质坚硬,适合做家俱和饰材;其果柄由花序轴在结果时膨大,扭曲形成,多分枝,弯曲不直,形似鸡爪,在分枝及弯曲处常更膨大如关节状,分枝多呈丁字形或相互成垂直状,俗称果实,在霜降后涩味减轻变甜,并略带芳香,可以用以食用或酿酒。另外,树皮、叶、果实和种子均可入药。树皮主治腓肠肌痉挛、小儿积食等;叶主治酒醉、风热感冒、外感腹痛等;果实蒸熟浸酒,作滋养补血用。种子入药名为枳椇子,其性平, 味甘,具清热利尿、止渴除烦、解酒毒的功效,主治热病烦渴、呃逆、呕吐、小便不利、酒精中毒等症。枳椇目前多为野生状态,由于种子不易发芽,野生成林极为罕见。采用组织培养技术,可在短期获得大量种苗,对于种质资源保护及开发利用有一定的参考价值。