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长唇羊耳蒜的组织培养与快速繁殖
一、植物简介
长唇羊耳蒜,地生草本,假鳞茎卵形或卵状长圆形,叶通常2枚,极少为1枚(仅见于假鳞茎很小的情况下),卵形至椭圆形,膜质或草质,花葶长7-28厘米,通常比叶长1倍以上;花序柄扁圆柱形,两侧有狭翅;总状花序通常疏生数朵花,较少多花或减退为1-2朵花,花淡紫色,但萼片常为淡黄绿色,蒴果倒卵形,花期5月,果期10-11月,产浙江、江西、湖北、湖南、广东北部、广西北部(全州).和贵州东部(凯里)。生于林下阴湿处或岩石缝中,海拔600—1200米。
二、培养条件
种子萌发培养基:
1/2MS+100ml/L椰乳;
芽增殖培养基:
1/2MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.1mg/L+100ml/L椰乳;
壮苗及生根培养基:
1/2MS+IBA0.2mg/L+2g/L活性炭。
以上培养基均加3.0%蔗糖和0.6%琼脂,pH5.2-5.4,培养温度为(25±2) ℃,光照强度为40µmol·m
-2
·s
-1
,光照时间12h/d。
三、材料与方法
取人工授粉120d成熟的种子,经自来水洗净后,置于10% 次氯酸钠溶液中消毒20min,用70%的酒精表面消毒30s,再以0.1%升汞溶液消毒15min,最后用无菌水冲洗5次。将洗净的成熟种子置于灭菌滤纸上吸干水分,用解剖刀切开荚果,将种子散落到培养基中。
四、生长与分化
种子萌发:播种后的种子先进行暗培养,再转到光下培养。在黑暗培养中,接种到种子萌发培养基上的种子,7周左右可见白色原球体;移至光下培养5周左右,原球茎转绿,继续培养3周左右,原球茎开始分化出叶原基。
原球茎继代增殖:将初代培养的原球茎和芽的混合体在芽增殖培养基上继代培养,原球茎迅速萌发出大量的芽,在芽的基部又有新的原球茎产生。
生根培养:将较大的无根苗转入生根培养基上培养,7周后形成3-5 cm的小苗。
五、炼苗移栽
将培养瓶置于温室中炼苗2周后,从培养瓶中取出生根苗,洗去附着的培养基。将苔藓用1 000倍多菌灵溶液浸泡1h,挤干水分,包裹出瓶苗的根部,种植于穴盘中温度保持在20℃以上,置于阴凉通风处。在此期间不浇水,以利新根生长和防止病害发生。5周后移入温室中栽培。