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组培知识

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东北刺人参组培快繁及种质保存技术

一、植物简介
东北刺人参(Echinopanax elatus Nakai)为五加科刺人参属多年生落叶乔木,其干燥根、根茎和茎均可入药。刺人参具有补气壮阳;止咳;通络。主气虚体弱、神疲乏力、畏寒肢冷、阳痿、虚咳久嗽、风寒湿痹、糖尿病、高血压病等功效。是一种很有前途的中草药。
二、培养条件
愈伤组织诱导培养基:
1/2B5 + 6-BA 1.0mg/L + NAA 1.0mg/L + IBA 0.2mg/L + KT 0.1mg/L + VC 50mg/L;
愈伤组织增殖培养基:
2/3MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.5mg/L + VC 50mg/L;
愈伤组织再分化培养基:
MS + 6-BA 1.0~2.0mg/L + NAA 0.05mg/L + VC 50mg/L;
生根培养基为:
1/5MS + IBA 1.0mg/L;
种质保存最适宜的培养基:
1/10MS(大量元素) + 1/3MS(微量元素) + 1/2MS(铁盐) + 1/4MS(有机物质)。
诱导培养基以B5作基本培养基,附加蔗糖(15g/L)、琼脂(6.5 g/L);pH 5.5。继代、再分化、生根及种质保存培养基均MS作基本培养基,附加蔗糖30g/L (生根培养为15g/L)、琼脂6.5g/L,温度控制在(24±2)℃ ,光照强度800~1 200 lx,光周期8~10h/d。
三、材料与方法
材料:长白山区东北刺人参带叶柄嫩叶。
外植体处理:将东北刺人参嫩叶连同叶柄剪下,流水冲洗20min后,用20%青霉素溶液浸泡10min。在超净工作台上用70%酒精浸泡材料8~15s,用0.1%升汞溶液浸泡5~8min,无菌水冲洗4~6次。用无菌滤纸将外植体表面的水分吸干,然后将其接种到不同培养基中进行诱导。
四、生长与分化
将外植体接种到愈伤组织诱导培养基上进行诱导,然后将活跃生长的愈伤组织进行继代,继代到一定数量后,将愈伤组织接种到愈伤组织再分化培养基上培养。再分化后即可进行生根培养。