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组培知识

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冬慈姑组培技术研究

1植物简介
慈姑(Sagittarai tri~lia)又名燕尾草,泽泻科多年生草本植物。球茎为食用部分,富含淀粉,蛋白质含量5.6%,脂肪含量0.2%,营养丰富,风味独特,是深受消费者喜食的冬春水生蔬菜,民间素有“内火旺喝点慈姑汤”的说法。
2培养条件
启动培养基:MS+6-BA4mg/L+NAA1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L
分化培养基:MS+6-BA2mg/L
增殖培养基:MS+6-BA4mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/LpH值5.8,培养温度为(25±2)℃,光照强度1500~2000lux,光照时间12h。
3材料与方法
取黄皮慈姑茎尖,经10%NaClO浸泡20min,75%乙醇消毒10s,0.1%升汞浸泡8min,无菌水清洗4次,剥去3层鳞片。
4生长与分化
切取0.5cm的茎尖接种到启动培养基上,培养4d,外植体呈绿色,长出第1片新叶时把外植体转到分化培养基和增殖培养基上继续培养。在培养基上生长4~5周后,把组织转移到新分化培养基上。在分化培养基上,外植体先抽生根状茎,长到3节时顶端开始膨大,10d后根状茎伸长到5节,顶端向上长成小植株,一般情况下每个组织抽生5条左右的根状茎。接着转移到增殖培养基上,此时外植体不抽生根状茎,直接从基部分化出4~5个再生小植株,每株5~6片叶,虽植株纤弱,但长势旺盛,再生植株基部长出约2~5条的白根。再生小植株长到5~6cm,有10条左右的根系时,将其转接继代,重复以上过程,此过程约28d,此时植株不需诱导生根,即能生长出发达的根系。