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山居雪灵芝的组培技术研究
1.植物简介
山居雪灵芝(学名:Arenaria edgeworthiana),为石竹科无心菜属的植物。多年生垫状草本植物,花瓣白色。花期7~8月。分布在锡金、尼泊尔以及中国大陆的西藏等地。
2.培养条件
启动培养基:MS基本培养基;
增殖培养基:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L;
生根培养基:1/2MS+NAA0.2mg/L。
以上培养基中均加入30g/L蔗糖和7g/L琼脂,pH为5.8~6.0。培养温度为(25±2)℃,光照强度40~60μmol?m-2?s-1,日光灯补光,光照时间16h/d。
3.材料与方法
在生长健壮、无病虫害的优良母株上剪取带芽茎段,先用洗衣粉漂洗,然后流水冲洗60min左右,在超净工作台上先用75%的酒精浸泡30~40s,无菌水冲洗1遍,再用20%的次氯酸钠溶液消毒10min,无菌水冲洗4遍,接种于启动培养基上。
4.生长与分化
在诱导培养基上,约2周左右侧芽开始萌动,发出2~4个新芽。将初代培养萌发的嫩茎剪成小茎段,接种到增殖培养基中,2周后陆续长出新芽。根据长势可多次反复切割长出的嫩茎。继代培养的间隔时间一般为30~40d。将继代增殖中生长健壮的嫩茎剪成长约1cm的茎段,接入生根培养基中进行生根。
5.炼苗移栽
先在室温条件炼苗2d,然后将瓶盖完全打开,继续炼苗2~4d。移栽时,用镊子小心地把苗从培养瓶中取出,用自来水将黏附于组培苗根部的培养基清洗干净,然后栽种到经过消毒处理的河沙中,浇透水,喷施绿亨2号,防止烂根,将移栽好的苗放到阴凉处1周,并注意保湿遮荫。待生长比较稳定后再放到阳光下让其生长。